大鼠分泌型磷脂酶A2ELISA檢測試劑盒
簡單介紹
大鼠分泌型磷脂酶A2ELISA檢測試劑盒的詳細介紹
中文名:大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA檢測試劑盒
保存:2~8℃
有效期:6個月
樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式:現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
大鼠分泌型磷脂酶A2ELISA檢測試劑盒 常見問題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍;
2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理;
3、洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動;
4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時候先應該保證板的清潔干凈;
7、嚴格按照說明書操作。
大鼠分泌型磷脂酶A2ELISA檢測試劑盒 ELISA 試劑盒 17 個相關操作技巧如下:
1. 切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2. 合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3. 在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4. 務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的度
5. 樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
6. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7. 未使用完的酶標板或者試劑,請于 2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液。
8. ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
9. 剩余樣品及廢棄物應經 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測量時先用此孔調 OD 值至零。
12. 手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置 15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14. 沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15. 在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16. 吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準確。
17. 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l,然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50?l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50?l,再加入顯色劑 B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50?l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
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