雞傳染性支氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒
簡單介紹
雞傳染性支氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)介紹
雞傳染性支氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒是我司的熱銷產(chǎn)品之一,上海古朵生物科技有限公司是集研制開發(fā)、銷售、fu務(wù)于一體的高新技術(shù)企業(yè),公司產(chǎn)品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測(cè)劑,du品快速檢測(cè),動(dòng)物疾病防疫檢測(cè)試劑,免疫診斷試劑、臨床血液學(xué)和體液學(xué)檢驗(yàn)試劑、微生物檢驗(yàn)試劑、分子生物學(xué)檢驗(yàn)試劑、臨床生化試劑、有機(jī)試劑等眾多領(lǐng)域。
名稱:雞傳染性支氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒
英文名:Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Infectious Bro
供應(yīng)商:古朵生物
產(chǎn)地:國產(chǎn)|進(jìn)口
檢測(cè)樣本:血清
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫法
產(chǎn)品規(guī)格:96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保質(zhì)期:12個(gè)月
儲(chǔ)藏:4~30℃密封干燥保存,忌冷凍,避免陽光直射。
用途:用來檢測(cè)雞血清中的禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)抗體
雞傳染性支氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒 【試驗(yàn)原理】
臨床上,傳染性支氣管炎是一種急性、高度傳染的病毒性疾病,任何日齡的雞都可以感染。IBV的潛伏期為24-72小時(shí)。疾病侵害雞的呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)。青年雞表現(xiàn)為急性呼吸道癥狀及氣管損傷。死亡率可高達(dá)。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)。血清中的IBV抗體水平及整個(gè)雞群的免疫狀況可用ELISA方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
將滅活的抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗IBV抗體將與包被在微孔板上的IBV結(jié)合,形成IBV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗雞IgG的酶標(biāo)結(jié)合物至微孔板中,酶標(biāo)物將與IBV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種黃色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標(biāo)儀(405-410nm)測(cè)定。
【一個(gè)微孔板所需的試劑的量】
樣品平均吸光度值 - 陰性對(duì)照吸平均吸光度值
=樣品與陽性對(duì)照比值(Sp)
陽性對(duì)照平均吸光度值 - 陰性對(duì)照平均吸光度值
Sp ×(100)= ELISA Unit (EU) 陽性對(duì)照值設(shè)為100 EU
【結(jié)果判定及EU單位說明】
IBV ELISA 值 說明
小于10EUs IBV抗體為陰性
10-15 EUs IBV抗體為弱陽性,應(yīng)被認(rèn)為經(jīng)過免疫或暴露于IBV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
15-75 EUs IBV抗體適度陽性
>75 EUs IBV抗體強(qiáng)陽性
【操作步驟】
1. 將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品震蕩均勻。
5. 陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl :800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對(duì)照、陽性對(duì)照分別加入微孔中,每種做兩個(gè)平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)(405nm或410nm作為主要波長,630nm或650nm為參考波長),計(jì)算結(jié)果。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來水沖洗。
3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,使用期限為1個(gè)月)。
4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以完全溶解。
5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。
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