植物線粒體提取試劑盒
簡單介紹
植物線粒體提取試劑盒的詳細介紹
規(guī)格:50T
供應商:古朵生物
分類:細胞組分分離
儲存條件:4℃,6個月
產(chǎn)品用途:植物線粒體制備試劑盒又稱植物線粒體提取試劑盒,適用于從植物葉片、塊莖或黃花苗中分離線粒體以便進行結構和功能研究
注意事項:本產(chǎn)品僅用于科學實驗
植物線粒體提取試劑盒 產(chǎn)品簡介:
線粒體(mitochondria)是真核細胞中產(chǎn)生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質(zhì)—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行終的氧化,并通過偶聯(lián)磷酸化生成ATP,供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的,本試劑盒用簡便快速的方法即可在40 分鐘內(nèi)提取得到線粒體。
植物線粒體提取試劑盒 注意事項:
● 本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
● 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
植物線粒體提取試劑盒 使用注意事項:
1. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
2. 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
1. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的 1g 植物組織樣本剪碎,采用以下一種方法處理:
i. 加入 3ml 提取液后用勻漿機/勻漿器勻漿。
ii. 置于研缽中用液氮研磨,研磨后加入 3ml 冷的提取液。
iii. 加入 3ml 提取液直接置冰上研磨。
2. 將勻漿用 250 目細胞篩或3 層紗布或脫脂棉過濾。或者在4℃,100×g 力條件下離心1 分鐘,收集上清,棄沉淀。。
3. 將濾液 700g 離心10 分鐘。取上清。
4. 將上清 11000g 離心20 分鐘。
5. 棄上清,沉淀中加入 1.5ml 線粒體保存液重懸。
6. 11000g 離心15 分鐘。
7. 棄上清,沉淀即為線粒體。
8. 用線粒體保存液懸浮線粒體,置冰箱備用或直接用于下游實驗。
特點:
1.專一性強??乖c抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應用酶免吸附技術進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置.
樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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