48T/96t 褪黑素(MT)ELISA試劑盒說明書
產(chǎn)品名稱:48T/96t 褪黑素(MT)ELISA試劑盒說明書
產(chǎn)品型號:48T/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48T/96t 褪黑素(MT)ELISA試劑盒說明書的詳細(xì)介紹
中文名:褪黑素(MT)ELISA試劑盒
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點:敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
褪黑素(MT)ELISA試劑盒說明書 常見問題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍;
2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理;
3、洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動;
4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應(yīng)的時候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時候先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
7、嚴(yán)格按照說明書操作。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
褪黑素(MT)ELISA試劑盒說明書 17 個相關(guān)操作技巧如下:
1. 切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
2. 合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
3. 在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4. 務(wù)必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的度
5. 樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
6. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于 2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液。
8. ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
9. 剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào) OD 值至零。
12. 手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置 15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13. 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14. 沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15. 在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
16. 吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。
17. 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
訂購說明:
1、大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日價格為準(zhǔn)。
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