48T/96t 牛多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒
簡單介紹
48T/96t 牛多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:牛多效生長因子(PTN)ELISA 試劑盒
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式:現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
牛多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒 操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
注意事項:
1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
2.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
9.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
牛多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒 17 個相關操作技巧如下:
1. 切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2. 合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3. 在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4. 務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的度
5. 樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。
6. 為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7. 未使用完的酶標板或者試劑,請于 2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液。
8. ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
9. 剩余樣品及廢棄物應經 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測量時先用此孔調 OD 值至零。
12. 手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置 15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14. 沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15. 在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16. 吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準確。
17. 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
訂購說明:
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