48t/96t 人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡(jiǎn)單介紹
48t/96t 人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒的詳細(xì)介紹
中文名:人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
英文縮寫:OVA-sIgG Elisa Kit
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒 血漿樣本直接測(cè)定前處理方法:
(1)加酶抑制劑:準(zhǔn)確采全血若干毫升,注入預(yù)冷的加有抗凝劑的塑料指形管中,迅速低溫離心,取血漿低溫保存待測(cè)。抑肽酶有液體的與固體的。固體的抑肽酶可用生理鹽水溶解。
(2)酸化處理:每毫升血漿加1mol/l HCl 0.2ml,低溫保存待測(cè)。以上兩種方法,任選一種即可。
血漿樣本的間接測(cè)定 血標(biāo)本經(jīng)提取后,可去除蛋白質(zhì)等干擾因素,并使微量的生物活性肽濃縮,但較費(fèi)時(shí),成本也高。常用的提取方法有:
(1)柱層析提取法:有多種層析柱可供提取不同的神經(jīng)肽,其中較為方便的是用Sep-pak C18層析柱提取。主要步驟:
①柱的預(yù)處理:該柱有兩頭,長頭連接注射器,可注入溶液與樣品,短頭為排出口。預(yù)處理時(shí)注入乙腈10ml。蒸餾水20ml,使柱中的生物膠活化。
②注入樣品(如血漿、腦脊液、腹水、尿等):樣品中的水份流出,生物活性肽、蛋白及雜質(zhì)等吸附在生物膠上。血漿上柱前,如先去除蛋白,可增加柱子的使用時(shí)間。
③淋洗:用4%HAC溶液100ml注入柱中,以洗去一些雜質(zhì)。
④洗脫:用7ml酸性乙腈作為洗脫劑,注入柱中,把生物活性肽洗脫下來,收集在塑料指形管中。
⑤清洗:用乙腈、蒸餾水清洗柱子,以備后用。
⑥將洗脫液吹干,低溫保存待測(cè)。測(cè)定時(shí)可加入一定量的緩沖液溶解。
人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒 操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
相關(guān)產(chǎn)品
在線留言 |