人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒使用說明書
簡單介紹
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒使用說明書的詳細介紹
中文名:人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
英文名:Human lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒使用說明書 操作使用中常見問題:
一、ELISA試驗中結(jié)果顯色淡、靈敏度品低的原因。
1、移液的樣品吸量不足,移液時抽吸、排放太快,移液嘴內(nèi)壁掛液太多貨內(nèi)壁不清潔,造成加樣量不準(zhǔn)。
2、恒溫箱溫度不是37℃(或43℃),或多塊反應(yīng)板重疊放置造成板孔內(nèi)的實際溫度偏差,使抗原、抗體復(fù)合物形成過少。
3、保溫時間不足,抗原、抗體反應(yīng)不完全
4、顯色劑加入量不足。
5、顯色液的A、B液比例不對。、
6、洗滌時沖擊力過大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數(shù)增加,導(dǎo)致已形成的抗原、抗體復(fù)合物洗脫。
7、底物反應(yīng)的溫度不夠,時間不足。
8、試劑盒在運輸、保存期間放置的溫度太高、時間過長,造成抗原、抗體效價下降,酶的活力降低。
9、試劑盒已超出保存有效期,抗原、抗體效價下降,酶活力降低。
注意事項:
⑴ 嚴(yán)格按照人脂蛋白脂酶(LPL)elisa試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至zui低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒使用說明書特點:
1.專一性強??乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.
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