48t/96t 小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱:48t/96t 小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/96t 小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒的詳細(xì)介紹
中文名:小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
別名:小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA Kit
貨號(hào):fk-m00216
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存溫度:2-8℃低溫保存
有效期:6個(gè)月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
1、適用于血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
2、可檢測動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等。
3、可檢測指標(biāo)齊全:白介素,干擾素,肺炎衣原體,血管緊張素,炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等指標(biāo)。
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1:預(yù)包被板: 96T/48T
2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7:終止液: 1N 12mL x 1
8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒操作說明書樣本的處理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用,胃液、唾液的采集時(shí)間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清時(shí),一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 3、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 4、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?br /> 5、不貼壁細(xì)胞(分泌性蛋白),將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作為標(biāo)本進(jìn)行檢測,如有需要可進(jìn)行透析或純化處理。
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1、 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 ,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37 溫育1小時(shí)。
3、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4、 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時(shí)。
5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、 每孔加底物溶液90 ,酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色(反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯時(shí),即可終止)。
7、 每孔加終止溶液50 ,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。
8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度( 值)。
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒操作說明書注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下:
小鼠半胱氨酸蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒
人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
人酪酪肽(PYY)ELISA試劑盒
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