人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒（大鼠，小鼠）組成及試劑配制：
1.酶聯(lián)板(Assay plate )：一塊(96孔)。
2.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)：2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。
5.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。
6.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)
7.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)
8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。



人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒（大鼠，小鼠）樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。



人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒（大鼠，小鼠）操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制)，37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl，37℃，60分鐘。
5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色(30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。



人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒（大鼠，小鼠）注意事項(xiàng)：
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
3.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
5.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
8.底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
9.加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
10.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。



人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下：
大鼠半乳糖凝集素8(Gal8)ELISA試劑盒
魚可溶性法尼醇X受體(SFXR)ELISA試劑盒
雞防御素β-4a(DEFβ-4a)ELISA試劑盒
犬膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒
魚Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒
小鼠白介素25(IL25)ELISA試劑盒
植物乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA試劑盒
人抗II型膠原自身抗體(Anti-CIIAb)ELISA試劑盒
豬可溶性白細(xì)胞介素2A受體ELISA試劑盒
豬II型前膠原氨基端原肽(PIINP)ELISA試劑盒
猴促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA試劑盒
豬可溶性糖蛋白130(Sgp130)ELISA試劑盒
牛血管生成素樣蛋白6(ANGPTL6)ELISA試劑盒
大鼠波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒
雞ⅡA組磷脂酶A2(血小板,滑膜液)(PLA2G2A)ELISA試劑盒
大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒
大鼠黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒
猴精氨酸(Arg)ELISA試劑盒
雞促性腺激素釋放激素1(GnRH1)ELISA試劑盒