48t/96t 人異質性胞核核糖核蛋白K ELISA試劑盒
簡單介紹
48t/96t 人異質性胞核核糖核蛋白K ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:人異質性胞核核糖核蛋白K(hnRNPK)ELISA試劑盒
別名:人異質性胞核核糖核蛋白K(hnRNPK)ELISA Kit
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
適用范圍:本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
檢測原理:狗膽囊收縮素(CCK)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
實驗方法: 酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
1、采用全進口原料和抗體:、靈敏、特異,嚴格引進技術標準進行批量生產。
2、的優(yōu)化方案:重復性高,可靠性。
3、技術服務:專業(yè),及時,耐心。
4、現(xiàn)貨供應,快遞送貨上門。
5、酶聯(lián)免疫檢測盒檢測樣本齊全:(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
人異質性胞核核糖核蛋白K ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人異質性胞核核糖核蛋白K ELISA試劑盒操作步驟:
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
7、溫育:重復4的操作。
8、洗板:重復5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
人異質性胞核核糖核蛋白K ELISA試劑盒注意事項:
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
3.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
5.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
7.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
8.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
9.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
10.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
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