48t/96t 兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品名稱(chēng):48t/96t 兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡(jiǎn)單介紹
48t/96t 兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)介紹
中文名:兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒
別名:兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA Kit
貨號(hào):fk-m00190
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個(gè)月
適用范圍:本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床。
ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品用途:用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒四大特性:
1.特異性強(qiáng):不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
3.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可向客服索取說(shuō)明書(shū)
4.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
5.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
8.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
9.溫育:操作同3。
10.洗滌:操作同5。
11.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
12. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
13. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒樣品收集、處理方法:
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
2、血漿-----應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清---檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清
4、組織標(biāo)本-----切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用
5、培養(yǎng)細(xì)胞----- 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作步驟:
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本od值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的od值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1.酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA檢測(cè)試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下:
小鼠絲裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)ELISA試劑盒
犬氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA試劑盒
小鼠短鏈脂肪酸(SCFA)ELISA試劑盒
馬基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)ELISA試劑盒
豬半乳糖凝集素2(Galectin-2)ELISA試劑盒
犬CD200分子(CD200)ELISA試劑盒
小鼠羧甲基賴(lài)氨酸(CML)ELISA試劑盒
大鼠異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒
豬凝血因子X(jué)IIIB鏈(F13B)ELISA試劑盒
雞維生素D(VD)ELISA試劑盒
小鼠骨骼肌α-輔肌動(dòng)蛋白(ACTN)ELISA試劑盒
豬溶血素O(LO)ELISA試劑盒
人血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGFAA)ELISA試劑盒
猴腫瘤壞死因子(配體)超家族,成員10(TNFSF10)ELISA試劑盒
人禽流感病毒抗體(AIV-Ab)ELISA試劑盒
大鼠腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒
大鼠A型鈉尿肽(NPPA)ELISA試劑盒
大鼠補(bǔ)體蛋白6(C6)ELISA試劑盒
猴可溶性半乳糖凝集素9(LGALS9)ELISA試劑盒
雞載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒
魚(yú)中性粒細(xì)胞激活蛋白2(NAP2)ELISA試劑盒
小鼠β淀粉樣蛋白40(Aβ40)ELISA試劑盒
魚(yú)細(xì)胞間粘附分子2(ICAM2)ELISA試劑盒
小鼠CD58分子(CD58)ELISA試劑盒
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