48t/9t 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒注意事項
產(chǎn)品名稱:48t/9t 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒注意事項
產(chǎn)品型號:48t/9t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡單介紹
48t/9t 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒注意事項的詳細介紹
中文名:綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
別名:綿羊白介素1(IL-1)ELISA Kit
貨號:fk-m00119
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
范圍:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞上清、組織勻漿等樣本。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒組織結構:
1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
ELISA試劑盒的儲存及有效期:
1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在次實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒注意事項含:
1、包被抗-HBs反應條 1瓶
2、酶結合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4、HBsAg陰性對照 1瓶
5、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶
6、顯色劑(TMB)A 1瓶
7、顯色劑(TMB)B 1瓶
8、終止液 1瓶
綿羊白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒操作方法:
1、加入待測標本每孔0.05ml,并設HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
結果:
比色法:波長450nm,先用空白孔校零點,然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。
備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8,實驗結果有效。
注意事項:
1、試劑盒置2℃~8℃保存。
2、使用前試劑應搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測試,余者應及時封存于冰箱中以備后用。
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)壓 實自封條,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加標準品和標本稀釋液,其余相應孔中加標本或不同濃度標準品(100ul/孔),用封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱孵育90分鐘。
3.提前20分鐘準備生物素化抗體工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加生物素化抗體稀釋液,其余孔加入生物素化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱孵育60分鐘。
6.提前20分鐘準備酶結合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶結合物稀釋液,其余孔加入酶結合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘。
9.打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
10.洗板5次
11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘。
12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值(3分鐘內(nèi))。在儀器保存讀數(shù)結果并打印一份紙質結果。
13.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結束。 建議保存酶標板框,以備下次或者今后試驗使用。
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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