48t/96t 豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱(chēng):48t/96t 豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):48t/96t
產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司
簡(jiǎn)單介紹
48t/96t 豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒的詳細(xì)介紹
中文名:豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
別名:豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個(gè)月
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產(chǎn)品用途:用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
本司ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1.特異性強(qiáng):不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實(shí)驗(yàn)效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹 底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒組成:
1、包被抗-HBs反應(yīng)條 1瓶
2、酶結(jié)合物 1瓶
3、HBsAg陽(yáng)性對(duì)照 1瓶
4、HBsAg陰性對(duì)照 1瓶
5、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶
6、顯色劑(TMB)A 1瓶
7、顯色劑(TMB)B 1瓶
8、終止液 1瓶
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒操作方法:
1、加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽(yáng)性對(duì)照2孔,HBsAg陰性對(duì)照2孔,空白對(duì)照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
ELISA試劑盒結(jié)果:
比色法:波長(zhǎng)450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷為陽(yáng)性,否則為陰性。
備注:陰性對(duì)照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽(yáng)性對(duì)照OD值≥0.8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中,英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 ELISA試劑盒液體類(lèi)標(biāo)本:
包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水,腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為50-1600pg/mL,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(50-1600pg/mL范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本終濃度。
6、若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
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