馬組織金屬蛋白酶抑制因子3,ELISA試劑盒，適用范圍:僅用于科研實驗，禁用于臨床

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3,ELISA試劑盒，規(guī)格，品牌，使用說明書由上海古朵生物詳細(xì)介紹，本司提供代測服務(wù)，專業(yè)經(jīng)營不是ELISA試劑盒品牌的進(jìn)口/國產(chǎn)ELISA試劑盒，采用酶聯(lián)免疫/ELISA法，一周內(nèi)出結(jié)果，所出售的ELISA試劑盒種屬涵蓋了大鼠，小鼠，人，豚鼠，牛，雞，羊，馬，兔，狗，豬，植物及其他動物，若有需要，歡迎訂購！

中文名：馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒
別名：馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA Kit
貨號：fk-m0046
供應(yīng)商：上海古朵
保存：2-8℃低溫保存
規(guī)格：48t/96t
有效期：6個月
適用范圍:僅用于科研實驗，禁用于臨床。
ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
檢測目的:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3,ELISA試劑盒 本試劑盒檢測原理：
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹 底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3,ELISA試劑盒 本試劑盒組織結(jié)構(gòu)：
1、 血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒組成及試劑配制：
1：預(yù)包被板: 96T/48T
2：酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA檢測試劑盒操作說明：實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)


馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA檢測試劑盒標(biāo)本的采集與保存:

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實驗室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次）。

3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測。

4、其它生物標(biāo)本：請1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA Kit注意：

1、以上標(biāo)本均需密封保存，4℃保存應(yīng)小于1 周，-20℃不應(yīng)超過1 個月，-80℃不應(yīng)超過2 個月。

2、標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

3、標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解。


馬組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA Kit操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。


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