BUNSEN本生:姬姆染色液的操作步驟及注意事項
姬姆染色液的操作步驟及注意事項
姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。Giemsa染色原理和結果與瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核著色偏深,核結構顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。
操作步驟:
1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上,并讓染液覆蓋整個標本涂色片染色1分鐘。
2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面(滴加之量為A液的2-3倍)以洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀,使兩液充分混合,染色3-10分鐘。
3、水洗(沖洗時不能先倒掉染液,應以流水沖去,以防有沉渣沉淀在標本上)。
4、干燥,鏡檢。
注意事項:
1. 血液涂片或骨髓涂片應厚薄均勻,以免影響染色效果。
2. 涂片染色中 Giemsa 染色后,請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。
3. 如果染色過深或過淺,應調整染色時間或工作液濃度。
4. 涂片染色和組織切片染色中,pH值對染色有一定影響,載玻片應清潔、無酸堿污染,以免影響染色效果。
5. 染色液經稀釋后液面應金屬光澤則表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。
6. 組織切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速沖洗,避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。
7. 0.5%乙酸分化常用于Giemsa組織切片染色,如有必要亦可用于細胞涂片,但其濃度應適量下調。0.5%乙酸分化切片時,切片呈粉紅色即可終止。
8. Giemsa組織切片染色中,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。
9. 涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結果,可按Giemsa Stain儲存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1配制Giemsa工作液,充分混勻,即為快速Giemsa染色工作液,將染色液滴加于細胞涂片或組織切片上,加熱染色,20~30s后重新加染色液,反復5~10次,其余步驟同上。
10. 染色液可重復使用,但不能多次重復,若有沉淀物應過濾后使用。
11. Regaud固定液: 按3%重鉻酸鉀:甲醛=4:1配制,臨用前混勻,1~2天后失效。
有效期:24個月有效。
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