elisa試劑盒公司試劑的配方配比說明
各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液;(4)ELISA實(shí)驗(yàn)終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液(7)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液。
(1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3 1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) ELISA實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6) ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2 32μl
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,
加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸或者氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4,后定容到1L.濃度為10mmol/L
(8)ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔,嚴(yán)防交叉污染。